熒光顯微鏡的原理和作用介紹
更新時間：2022-05-25 點擊次數(shù)：3927
熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) ： 熒光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學物質(zhì)的分布及定位等。 細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。
熒光的原理是某些物質(zhì)會在高強度的短波長光線照射下，會發(fā)出波長稍長的發(fā)射光（熒光）。
而我們一般都是觀察被激發(fā)熒光基團所發(fā)射出來的波長稍長的發(fā)射光（熒光）。
但是激發(fā)的光會很強，所以我們就需要把激發(fā)的光全部濾去，這樣才可以看到熒光基團的發(fā)射光（熒光）。
熒光顯微鏡一般都用高強度的汞燈做激發(fā)光源。使用濾色片把不需要的光濾去，只留下激發(fā)熒光集團的高強度很純的光線。這個單色的光線通過物鏡照射到樣本上之后，樣本會被激發(fā)出發(fā)射光（熒光），熒光和激發(fā)光都會沿著物鏡光路返回，這樣的話，就需要用一個二相色鏡把激發(fā)光濾去，只讓我們需要看到的熒光透過。
這個熒光沿著顯微鏡的光路*后到達目鏡下，然后進入我們的眼睛，我們就可以看到熒光基團所發(fā)出來的熒光了。
注：在熒光顯微鏡中，核心的是 1 熒光光源，因為熒光需要高強度的光才可以被激發(fā)出來，我們一般都用汞燈，另外還有長壽命金屬鹵素燈，當然還有激光。2 激發(fā)塊（幾個濾色塊組成的組件，一般有激發(fā)光濾色片、二相色鏡、發(fā)射光濾色片），因為我們的熒光基團都是在特定波長的光線下才可以激發(fā)，并且被激發(fā)的發(fā)射光也具有特定波長。所以需要選擇合適的激發(fā)塊（主要是選擇激發(fā)光濾色片、二相色鏡、發(fā)射光濾色片這三個的可以通過的光線波長等參數(shù)）。
另外物鏡也對熒光顯微鏡有很大影響。因為只有高檔次的物鏡才可以提供完好的色差矯正。
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